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玻連蛋白對(duì)高糖培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用

發(fā)布時(shí)間:2013/06/24 23:23

作者:王玉鳳??楊俠??董曉光?
????發(fā)表時(shí)間:中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志??2013年1月??第31卷??第1期?
????【摘要】??
????背景??玻連蛋白是一種多功能糖蛋白。本研究組前期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,玻連蛋白在缺氧小鼠視網(wǎng)膜中表達(dá)明顯增高,體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明高糖可以誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞人(UVECs)中玻連蛋白表達(dá)的增加。但目前尚未證實(shí)玻連蛋白在視網(wǎng)膜新生血管病變中的作用機(jī)制。?
????目的??觀察玻連蛋白對(duì)高糖培養(yǎng)下人UVECs的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)、細(xì)胞遷移、細(xì)胞成管能力的影響。?
????方法??建立高糖培養(yǎng)的人UVECs體外模型,利用干擾RNA技術(shù)干擾玻連蛋白的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)分為高糖組(含50mmol\L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)人UVECs)、陰性干擾組(對(duì)照用siRNA預(yù)干擾人UVECs后,再用含50mmol\L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)),在各組中分別利用Western?bolt法檢測(cè)玻連蛋白的表達(dá)量,免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)合熒光顯微鏡觀察人?UVECs微絲骨架,劃痕法觀察人UVECs的遷移情況,Matrigel法檢測(cè)人UVECs的成管能力。各組的總體差異比較采用單因素方差分析,組間的多重比較采用LSD-t檢驗(yàn)。?
????結(jié)果??Western?bolt結(jié)果顯示,0?h時(shí)3個(gè)組間玻連蛋白表達(dá)量的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.064,P>0.05);培養(yǎng)24?h時(shí)高糖組、陰性干擾組、陽(yáng)性干擾組中玻連蛋白的表達(dá)量依次降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=15.519,P????結(jié)論??玻連蛋白可以引起高糖培養(yǎng)的人UVECs發(fā)生細(xì)胞骨架重塑、細(xì)胞遷移能力增加、細(xì)胞成管能力增強(qiáng),可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)新生血管形成的一個(gè)重要影響因素。?


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